武汉阿波罗医院

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双水相萃取法香菇中香菇多糖分离

香菇Lentinus edodes又名香菌冬菇,属于真菌门担子菌纲伞菌目侧耳科香菇属,是世界著名的食用菌之一。香菇具有较高的医疗保健价值。其中,香菇多糖是以增强T细胞和巨噬细胞功能为主的免疫增强剂,具有显著的、独特的抗肿瘤活性,并能够减轻放疗和化疗的毒性反应。徐海军等人采用双水相技术研究了香菇多糖的提取工艺。

即:聚乙二醇相对分子质量在6000时对香菇多糖的提取效果较好;聚乙二醇浓度在24%时硫酸铵浓度在30%时组成的双水相体系提取香菇多糖的效果最好,此时香菇多糖的分配系数可达到1.90,收率可达到57.42%。

双水相萃取法葛根中葛根素的分离

葛根为豆科植物野葛Pueraria lobata (Willd.) Ohwi或甘葛藤Pueraria thomsonii的干燥根,有解表退热、生津止渴、止泻的功能,并能改善高血压病人的项强、头晕、头痛、耳鸣等症状。有效成分为黄豆异黄酮苷元、黄豆异黄酮苷及葛根素等。其中葛根素具有扩张冠状动脉、降低血压、抗心律失常、改善微循环、降血糖等功效,是重要的心脑血管治疗用药。霍清等对葛根素在双水相体系中的分配特性进行了研究。

实验表明,采用聚乙二醇/(NH4)2SO4双水相体系时,最大的分配系数可达148.2,最大收率99.09%。采用丙酮/K2HPO4双水相体系时,最大的分配系数可达36.7143,最大收率99.55%,葛根素大部分被分配在丙酮相(上相)中。王志辉等研究葛根素在乙醇/硫酸铵两水相体系中的分配特性及其影响因素,在其最佳萃取条件时,最大的分配系数可达16.30,回收率94.33%,葛根素分配在上相。

葛根素
葛根素

双水相萃取法黄芩中黄芩苷的分离

黄芩Scutellaria baicalensis Georgi别名山茶根、土金茶根,是唇形科黄芩属多年生草本植物。黄芩的根入药,味苦、性寒,有清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎等功效。主治温热病、上呼吸道感染、肺热咳嗽、湿热黄疸、肺炎、痢疾、咯血、目赤、胎动不安、高血压、痈肿疖疮等症。黄芩中的化学成分以黄酮为主,如:黄芩苷、黄芩苷元、汉黄芩素和汉黄芩苷等。黄芩苷(C21H18O11)为淡黄色结晶,作为黄芩有效成分之一,具有抗氧化、抗炎、抗变态、抗菌、抗病毒以及抗肿瘤等广泛药理作用。

赵爱丽等利用聚乙二醇/K2HPO4-H2O双水相体系对黄芩苷进行分离纯化,结果表明双水相中聚乙二醇的分子质量、聚乙二醇浓度、K2HPO4浓度、pH及温度等因素都对双水相体系的相比、分配系数及黄芩苷的收率有一定影响,在最佳分离条件下,黄芩苷最大的分配系数可达29.8,最大收率98.6%。黄芩苷大部分被分配在聚乙二醇相(上相)中。

黄芩苷
黄芩苷

双水相萃取技术的研究发展

常见的双水相萃取体系有两类;聚合物/聚合物/水和聚合物/盐/水,这两类双水相系统各有优缺点:前者体系对生物活性物质变性作用低,界面吸附少,但是所用的聚合物(如葡聚糖)价格较高,成本高,而且体系黏度大,影响工业规模应用的进展;后者也由于高浓度盐而受到限制。因此,寻求新型双水相体系成为双水相萃取技术的主要发展方向之一。

廉价双水相体系

廉价双水相系统主要是寻找一些廉价的高聚物取代现用昂贵的高聚物,如采用变性淀粉、乙基羟乙基纤维素、糊精、麦芽糖糊精等代替昂贵的葡聚糖;羟基纤维素、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮等代替PEG,制成廉价的双水相体系。

表面活性剂双水相体系

阴离子表面活性剂和阳离子表面活性剂在一定浓度和混合比范围内、无任何外加物质情况下的组成的混合体系,可以形成两个互不混溶和平衡共存的水相,称为表面活性剂双水相,常见的阴离子表面活性剂为十二烷基硫酸钠(SDS);常见的阳离子表面活性剂为溴化十二烷基三乙胺(C12 NE)。表面活性剂的作用是改变界面张力、上下相组成等两相特性,从而改变溶质的分配行为。阴阳两种离子型表面活性剂组成的双水相均为很稀的表面活性剂水溶液(浓度在1%以下),含水量可达99%,更适用于生物样品的分离。但阴阳两种离子型表面活性剂以1:1混合时极易发生沉淀,可以通过选择合适的溶剂(如短链脂肪醇)来改善其溶解度和促进特定有序组合体及双水相的形成。

此外,还可利用临界胶束浓度(critical micelle concentration, CMC)下表面活性剂的特异自组织行为及良好的稳定性形成的双水相,具有含水量更高、两相更容易分离、表面活性剂用量很少且可循环利用等独特的优点。

在聚合物上引入电荷

在PEG或葡聚糖等聚合物上引入电荷增大两相间的电位差,可以改变溶质的分配。如:带正电的三甲胺基-PEG(TMA-PEG)、氨基-PEG(PEG-NHz)和带负电的PEG-磺酸盐(S-PEG)、羧基-PEG(PEG-COOH)。分离蛋白质时可根据蛋白质的带电情况来选择荷电PEG,以达到改变蛋白质分配的目的。如将PEG接上三甲胺基基团后使上相带正电,在pH较小时,带正电荷蛋白就不断向下相富集;而当pH较大时,带负电荷的蛋白则开始向上相富集。

热分离型双水相体系

热分离型双水相体系是一种以热分离聚合物和水组成的新型双水相体系,热分离聚合物的水溶液在高于某一临界温度时分离成两相,该温度点被称为浑浊点。体系分相的依据仍是聚合物之间的不相溶性,但此性质与特定的临界温度有关。大多数水溶性热分离聚合物是环氧乙烷(EO)和环氧丙烷(PO)的随机共聚物(简称EOPO聚合物)。环氧乙烷环氧丙烷共聚物(EOPO)具有较低的浑浊点,在水溶液中,当温度超过其浑浊点时会形成水的上相和富含聚合物的下相,目标产物分配在水相,而富含EOPO的一相得以回收。

双水相萃取技术与其他技术集成

双水相萃取技术是一种较好的生物分离单元操作技术,将双水相萃取技术与其他相关的生物分离技术进行有效组合,实现了不同技术间的相互渗透、相互融合,充分体现了集成化的优势,有利于工业化的推广和应用,现已成为双水相萃取技术发展的新趋势。主要有如下三个方面:一是与温度诱导相分离、磁场作用、超声波作用、气溶胶技术等常规技术联用,改善双水相分配技术中成相聚合物回收困难、相分离时间较长、易乳化等问题。二是与亲和沉淀、高效色谱等分离技术实现过程集成,充分发挥双方的优势,提高分离效率,简化分离流程。三是将生物转化、化学渗透释放和电泳等技术引入双水相分配,创新分离技术。主要进展有如下几方面。

1. 磁场增强双水相分离 在系统中添加铁氧颗粒,利用磁场作用可加速相分离。双水相系统中,铁氧颗粒分配于下相。在磁场作用下,铁氧颗粒定向移动,带动了包含有铁氧颗粒的下相小液滴聚集成相,从而缩短了相分离时间。

2. 超声波加强的双水相分配 利用固定波长的超声波可加速双水相系统的相分离。经超声波的加速作用,相分离时间几乎与相比无关,上下相的相体积差别越大,增强效果越明显。

3. 双水相与亲和技术的集成 在聚合物上耦联特定的亲和配基,使双水相萃取的选择性更高,分离产物纯度更高。也可与亲和色谱技术联用。

4. 双水相与高速逆流色谱的集成 以双水相溶剂系统取代高速逆流色谱原有的有机相/水相系统,通过在高速逆流色谱的螺旋管中做行星式运动,使被分离物在两相之间形成多次分配,可以在短时间内实现高效分离。

另外,双水相萃取技术与电泳、生物转化、微胶囊、气溶胶增强等技术结合,可强化传质、减少易乳化,简化工艺过程,提高分离效率,降低能耗及生产费用等。

由于双水相萃取技术已显示出众多其他分离技术不具备的优点,因此,需大力加强有关双水相分配的基础理论研究。随着工业化的一些关键问题的解决,双水相萃取技术必将成为一种应用前景广阔的新型生物分离技术。

双水相萃取技术的优点与缺点

双水相萃取技术的优点

1. 含水量高 整个双水相体系的含水量高达70%~90%,活性蛋白或细胞在这种环境中不会失活或变性,但可以以不同比例分配于两相,这就克服了有机溶剂萃取中蛋白质容易失活和强亲水性蛋白难溶于有机溶剂的缺点。

2. 生物相容性高 双水相体系的相间张力大大低于有机溶剂与水相之间的相间张力,萃取是在接近生物成分生理环境的条件下进行,双水相体系中成相物质通常对酶或细胞没有毒性,对生物分子的结构不但没有破坏,反而有稳定作用,而传统的水-有机溶剂两相萃取体系中的有机溶剂往往使生物活性物质变性或者失活。

3. 萃取条件温和,操作方便 双水相萃取操作过程在常温常压下进行。相分离条件温和,因而会保持绝大部分生物分子的活性,可以直接从含有菌体的发酵液和培养液中提取所需的蛋白质,还能不经过破碎直接提取细胞内酶。大量杂质可与固体物质一同除去。

4. 分离迅速 双水相体系的界面张力小,分相时间短,有利于两相之间的质量传递。传质过程和平衡过程迅速。如操作条件选择适当,自然分相时间一般为5~15min,可以实现快速分离。

5. 可以通过选择适当双水相体系,提高分配系数和萃取的选择性 如果体系选择合适,提纯倍数可达2~20倍,目标产物回收率可达80%~90%。

6. 易于工艺放大和连续操作 双水相的分配系数仅与分离体积有关,按化学工程中的萃取过程原理将各种参数按比例放大而产物收率并不明显降低,这是其他过程无法比拟的,这一点对于工业应用尤为有利。且易于进行连续化操作,设备简单,可直接与后续提纯工序相连接,无须进行特殊处理。

7. 不存在有机溶剂残留 高聚物一般是不挥发性物质,因而操作环境对人体无害。

双水相萃取技术的缺点

双水相萃取技术作为一种新型的萃取分离技术,有着很多优点,但也存在着一定的局限性。要将这一技术开发应用到大规模生产过程,还有许多理论和实践方面的技术问题有待解决。比如双水相体系界面张力较小,虽有利于提高传质效率,但是较小的界面张力易导致乳化现象的产生,使相分离时间延长,分离效率降低。对双水相的研究结果只是建立在实验的基础上,大部分情况下不能外延,缺乏对过程规律的认识,目前没有建立一套较为完整的理论和方法解释并预测物质在双水相体系中的相行为和被分配物质在两相中的分配行为。

更为重要的是,双水相萃取聚合物的价格比较昂贵,而且体系黏度大。高浓度的盐废水不能直接排入生物氧化池,使其可行性受到环保限制,故有些对盐敏感的生物物质会在这类体系中失活。因此,开发廉价绿色新型的双水相萃取体系,成为人们研究的重点。

双水相萃取技术的应用领域

由于条件温和且易操作,可调节因素较多,近些年来,双水相萃取技术得到很大的发展,在蛋白质、生物酶、菌体、细胞以及氨基酸、抗生素、金属离子、天然产物等的分离纯化等方面均具有广泛的应用。

蛋白质的分离纯化

蛋白质和酶都是有生物活性的物质,在分离提纯过程中如果选择的提取体系不好,往往会造成蛋白质和酶的变性失活。双水相萃取就是考虑到这种现状,基于液-液萃取理论并考虑保持生物活性所开发出来的一种新型液-液萃取分离技术。工业上已有几种双水相体系用于从发酵液中分离提取蛋白和酶,绝大多数是用聚乙二醇作上相成相聚合物,葡聚糖、盐溶液和羟甲基淀粉的其中一种作下相成相物质。

金属离子分离

与传统的分离工艺相比,双水相体系对贵金属以及稀有金属的分离与检测具有环境友好、废弃物少、对人体无害、运行成本低以及工艺简单等优点。

抗生素的提取纯化

传统抗生素的提取纯化方法有以下4种:吸附法、溶剂萃取法、离子交换法以及沉淀法。双水相萃取技术与这4种方法相比,显示出高效化和节能化的优势。抗生素在提取过程中易变性失活,而双水相技术能保证其在温和的条件下得到分离纯化。

中药有效成分提取分离

由于天然植物中所含的化合物众多,特别是中草药有效成分的确定和提取技术发展缓慢,严重影响了我国中草药的发展与应用。随着双水相萃取工艺的不断发展,现已广泛地应用于天然产物的分离纯化,且效果明显。例如从栀子花中应用双水相萃取技术提取栀子苷,该双水相体系由PE62、磷酸二氢钾和乙醇构成,从500g栀子花能得到39g纯度为77%的栀子苷。双水相萃取也被应用到从甜菜中萃取甜菜红碱,双水相体系构成为PEG6000、(NH4)2SO4、H2O。

双水相萃取的常用设备

双水相萃取的基本过程包括双水相的形成、溶质在双水相中的分配和双水相的分离,因此双水相萃取技术的设备是根据这几个过程建立起来的。

相混合设备

静态混合器是常用的相混合设备之一。静态混合器的混合过程是由一系列安装在空心管道中的不同规格的混合单元进行的。由于混合单元的作用,使流体时而左旋,时而右旋,不断改变流动方向,不仅将中心液流推向周边,而且将周边流体推向中心,从而造成良好的径向混合效果。与此同时,流体自身的旋转作用在相邻组件连接处的接口上亦会发生,这种完善的径向环流混合作用,使物料达到混合均匀的目的。静态混合器的优点是停留时间均匀,无运动部件。在双水相系统中,表面张力很低,因而搅拌时很容易分散成微滴,几秒钟就能达到平衡,且能耗很少。

相分离设备

在双水相系统中,虽然两相较容易达到平衡,但两相分离则比较困难。这是因为两相的密度差小,且黏度较大。例如,聚乙二醇-盐系统,密度差仅为0.04~0.10kg/m3。上相聚乙二醇一般作为连续相,其黏度为3~15(mPa·s),而带细胞的碎片的下相,葡聚糖相黏度可达几千毫帕秒。达到分配平衡的两相进行分离时,可采用重力沉降法或离心沉降法,根据Stokes定律,其沉降速率(m/s)分别为:

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式中,d为分散相液滴的直径(m);μ为连续相黏度(Pa·s);Δρ为相间密度差(kg/m3);g为重力加速度(9.80665m/s2);r为离心半径(m);ω为离心角度速度(r/s)。

混合-澄清器可以用于双水相萃取,但由于它是借助重力实现相分离的,分离能力低,只能用于高聚物-盐体系。离心萃取器则不同,它是借助离心沉降,因此可以用于任何双水相体系,并易于实现连续化操作。常用的离心沉降设备有管式离心机和碟片式离心机,其碟片式离心机使用最多,下图表示的是流体在碟片式离心机中的流动方向。在使用时可以通过调节下相出口半径来调节界面的位置,使其正好处在悬浮液上升到碟片中的入口,这样可以避免由于表面张力太小使已分离的相重新混合。

碟片离心机中的流向
碟片离心机中的流向

双水相萃取的操作过程

双水相萃取在医药工业上应用的工艺流程主要由三部分构成:目标产物的萃取,聚乙二醇的循环,无机盐的循环。以生物细胞组织中蛋白质的分离为例来说明,流程图如下图所示。

338-1

目标产物的萃取

原料匀浆液与聚乙二醇和无机盐在萃取器中混合,然后进入分离器分相。通过选择合适的双水相组成,一般使目标蛋白质分配到上相,而细胞碎片、核酸、多糖和杂蛋白质等分配到下相。第二步萃取是将目标蛋白质转入富盐相,方法是在上相中加入盐,形成新的双水相体系,从而将蛋白质与聚乙二醇分离,以利于使用超滤或透析将聚乙二醇回收利用和目的产物进一步加工处理。

聚乙二醇的循环

在大规模双水相萃取过程中,成相材料的回收和循环使用,不仅可以减少废水处理的费用,还可以节约化学试剂,降低成本。聚乙二醇的回收有两种方法:①加入盐使目标蛋白质转入富盐相来回收聚乙二醇。②将聚乙二醇相通过离子交换树脂,用洗脱剂先洗去聚乙二醇,再洗出蛋白质。常用的方法是将第一步萃取的聚乙二醇相或除去部分蛋白质的聚乙二醇相循环利用。如下图所示。

聚乙二醇的循环图
聚乙二醇的循环图

1. 细胞悬浮液;2. 球磨机;3.PEG循环;4.PEG+盐;5. 静态混合器;6. 换热器;7. 盐;8. 储罐;9. 下相;10. 废料;11. 上相;12. 产品

无机盐的循环

将含无机盐相冷却,结晶,然后用离心机分离收集即可。还可使用电渗析法、膜分离法回收盐类或除去聚乙二醇相中的盐。

双水相萃取技术的原理

双水相萃取(aqueous two-phase extraction, ATPE)技术又称水溶液双相分配技术,是基于液-液萃取理论,融合传统萃取的成功经验,考虑保持生物活性的一种新型的液-液萃取分离技术。

该技术始于20世纪60年代,瑞典Albertson等人提出并利用双水相萃取技术分离生物分子,考察了蛋白质、核酸、病毒、细胞及细胞颗粒在双水相系统中的分配行为,对双水相萃取进行比较系统的理论和实验研究,测定了双水相的相图,为发展双水相萃取技术奠定了坚实的基础。双水相萃取技术具有条件温和、容易放大、可连续性操作等特点而备受关注。国内自20世纪80年代起开展了双水相萃取技术研究。

进入21世纪生物医药为主体的医药工业发展新时代,传统分离技术在处理生物医药产品时,处理量小、流程长、易失活、收率低和成本高,因而应用受到限制,不能与医药工业后处理工程要求相适应,阻碍了这些医药产品的工业化进程。双水相萃取技术便是在这种现状下得到发展,目前在蛋白质、抗生素、金属离子、天然产物等的分离纯化等方面均显现出广阔的应用前景。

双水相体系

早期人们研究发现,当明胶与琼脂或明胶与可溶性淀粉溶液相混时,得到一个混浊不透明的溶液,随之分为两相,上相富含明胶,下相富含琼脂(或淀粉),这种现象被称为聚合物的不相溶性。而两相的主要成分都是水,故称为双水相。双水相体系是指某些高分子有机物之间或高分子有机物与无机盐之间,在水中以适当的浓度溶解后形成互不相溶的两相或多相水相体系。

传统的双水相体系主要是双高聚物双水相体系,其成相机制是由于高聚物分子的空间阻碍作用,相互无法渗透,不能形成均一相,从而具有分离倾向,在一定条件下即可分为两相。一般认为只要两聚合物水溶液的憎水程度有所差异,混合时就可发生相分离,且憎水程度相差越大,相分离的倾向也就越大。可形成双水相体系的聚合物有很多,典型的聚合物双水相体系有聚乙二醇(PEG)/葡聚糖(DEX)、聚丙二醇/聚乙二醇和甲基纤维素/葡聚糖等。另一类双水相体系是由聚合物/盐构成的。此类双水相体系一般采用聚乙二醇作为其中一相成相物质,而盐相则多采用硫酸盐或者磷酸盐。常用的双水相体系见下表。

常用的双水相体系
常用的双水相体系

双水相萃取

双水相萃取的原理与液-液萃取相似,即利用不同物质在不相溶的两相中分配系数不同而达到分离。但两者的萃取体系的性质不同,前者是双水相体系,而液-液萃取是水-有机相体系。当物质进入聚合物或无机盐液形成的双水相体系后,由于表面性质、电荷作用和各种分子间作用力的存在和环境因素的影响,使其在两相间进行选择性分配,即在上相、下相中的浓度不同。该物质在两相的浓度比定义为分配系数K,由于各种物质的K值不同,可利用双水相萃取体系对不同物质进行分离。各种物质的分配系数取决于溶质与双水相系统间的各种相互作用,其中主要与静电作用、疏水作用等有关,分配系数是各种相互作用的和。

1. 静电作用 双水相系统中通常含有缓冲液和无机盐等电解质,当这些离子在两相中分配浓度不同时,将在两相间产生电位差,通称道南电位。荷电溶质的分配平衡将受相间电位的影响,其分配系数的对数与溶质的净电荷数成正比。由于同一双水相系统中添加不同的盐所产生的相间电位不同,故分配系数与净电荷数的关系因无机盐而异。因此体系中被萃取的物质表面带的电荷、系统中的盐类的电荷数以及pH对被萃取的物质所带电荷数的影响等都会对分配系数有影响。

2. 疏水作用 被萃取的物质表面均存在疏水区。疏水区占表面积的比例越大,疏水性越强。所以,不同物质具有不同的相对疏水性。在pH为等电点的双水相中,主要根据表面疏水性的差异产生各自的分配平衡。同时分配系数受双水相系统疏水性的影响。聚乙二醇/葡聚糖和聚乙二醇/无机盐等双水相系统的上相的疏水性较大。双水相系统的疏水性一般随聚合物的相对分子质量、浓度以及盐的浓度的增大而增大。

双水相萃取的影响因素

影响双水相萃取的因素较多,这是因为双水相中的分配系数是由化学电位、疏水作用、生物亲和力、粒子大小和被分离物质的构象效应等多种因素所决定,这些因素可以分为环境因素和结构因素两个方面。环境因素包括成相高聚物的种类与浓度、高聚物的亲和基团、盐的种类和浓度、成相采用的重力以及温度等。结构因素主要是亲水性的大小和电荷的影响。

1. 成相高聚物种类的影响 不同聚合物的水相系统显示出不同的疏水性,同一聚合物的疏水性又随其分子质量的增加而增加,其大小的选择取决于萃取分离的目的和目标产物的性质。所以成相聚合物种类的选择至关重要。水溶液中聚合物的疏水性按下列次序递增:

葡萄糖硫酸盐<甲基葡萄糖<葡萄糖<羟丙基葡萄糖<聚乙烯醇<聚乙二醇<聚丙三醇

2. 成相高聚物浓度的影响 当接近临界点时,被分离物质均匀地分配于两相,分配系数接近于1。如成相聚合物的总浓度或聚合物/盐混合物的总浓度增加时,系统远离临界点,此时两相性质的差别也增大,被分离物质趋向于向一侧分配,即分配系数或增大超过1,或减小低于1。

3. 成相高聚物分子质量的影响 当聚合物的分子质量降低时,被分离物质易分配于富含该聚合物的相。如在高聚物-葡聚糖系统中,高聚物的分子质量减小,会使分配系数增大,而葡聚糖的分子质量减小,会使分配系数降低。

4. 盐的影响 由于各相应保持电中性,因而在两相间形成电位差。因此对于带电荷的蛋白质等物质的萃取来说,盐的存在会使系统的电荷状态改变,从而对分配产生显著影响。如加入中性盐可以加强电荷效应,增加分配系数。盐的种类对双水相萃取也有一定的影响,因此变换盐的种类和添加其他种类的盐有助于提高选择性。不同的双水相体系中盐的作用也不相同。在高聚物/磷酸盐/水中加入氯化钠可以使万古霉素的分配系数由4提高到120,而在高聚物/水体系中只从1.55提高到5。

5. pH的影响 pH会影响被分离物质可以离解基团的离解度,因而改变被分离物质所带电荷和分配系数。pH也影响磷酸盐的离解程度,若改变337-i之间的比例,也会使相间电位发生变化而影响分配系数。如pH的微小变化有时会使蛋白质的分配系数改变2~3个数量级。

6. 温度的影响 温度主要会影响成相高聚物的组成,但对分配系数基本没有影响,主要是由于成相聚合物对物质有稳定化作用,因此在室温条件下操作,蛋白质等的活性收率依然很高,而且室温时黏度较冷却时低,有助于相的分离,同时节约了能源。

吸附澄清技术101果汁澄清剂用于银射合剂的制备

银射合剂是由土牛膝、银花、射干等多种中药组成的复方制剂,有清热利咽、消炎止痛的作用,主治急慢性咽喉炎、腮腺炎、流感等症。由于原工艺水提醇沉法不理想,在贮存过程中常出现一层摇不散的沉淀。后采用101果汁澄清剂除杂工艺并与原工艺水提醇沉法进行比较。101果汁澄清剂除杂澄清工艺为处方提取后的浓缩液加10%澄清剂20mL,静置24h,滤过;再向滤液加15%澄清剂15mL,静置24h,滤过;滤液加重蒸液及矫味剂等制成合剂。

试验结果表明:101果汁澄清剂除杂既能充分地保留提取液中的有效成分,又能保证制剂的稳定性,且生产周期短,成本低,故101果汁澄清剂除杂工艺优于水提醇沉法除杂工艺。